安捷伦色谱柱选择指南：反相、正相、HILIC如何选？

 

　　反相色谱柱：通用型分离

 

　　反相色谱柱是实验室常用的类型，其固定相为非极性（如C18、C8键合相），流动相为极性混合溶剂（水-甲醇/乙腈），分离机理基于“相似相溶”——弱极性至中等极性化合物与固定相作用力更强，保留时间更长。

 

　　安捷伦反相色谱柱具备高柱效与优异峰形，尤其适合药物、脂类、小分子有机物等分析场景。选择要点包括：分析物为非极性或中等极性、在水相或水-有机混合溶剂中溶解性良好；需高分辨率分离或梯度洗脱方案时，反相柱是优解。例如，药物杂质检测、环境污染物分析等常规实验，优先选用反相色谱柱。

 

　　正相色谱柱：极性化合物与异构体分离利器

 

　　正相色谱柱采用极性固定相（如硅胶、氨基(-NH₂)、氰基(-CN)键合相），流动相为非极性溶剂（正己烷、异丙醇），通过氢键、偶极-偶极作用实现分离——极性越强的化合物与固定相结合越牢固，后流出体系。

 

　　安捷伦正相柱适用于糖类、氨基酸、异构体等强极性或中等极性化合物分析。选择场景明确：当分析物在非极性溶剂中溶解性好，或需分离结构相似的异构体时，正相柱优势显著。需注意，正相柱对水分敏感，需严格控制流动相含水量，更适合等度洗脱模式。

 

　　HILIC色谱柱：强极性水溶性化合物的补充方案

 

　　亲水相互作用色谱（HILIC）是反相、正相的重要补充，采用极性固定相（如裸硅胶、酰胺基）与高比例有机相-水相流动相（乙腈-水，水相占比3%-40%），通过水膜分配与氢键作用保留强极性水溶性化合物——这类物质在反相柱中几乎无保留，在正相柱中溶解性不佳。

 

　　安捷伦系列专为强极性小分子设计，耐水性强、LC/MS兼容性好，尤其适合糖类、尿素、磷酸化化合物等分析，还可替代离子对色谱用于EPA方法1694。选择关键：分析物为强极性水溶性物质，或需匹配质谱检测器时，HILIC柱是理想选择。使用时需注意保持流动相有机相比例不低于40%，避免磷酸盐缓冲液析出。