依利特色谱柱作为一种高效的分析工具,在生物医药、食品、环境及生化等领域中发挥着重要作用。其基本原理基于液相色谱技术,通过固定相和流动相的选择与优化,实现生物样品中目标分子的高效、准确分离和检测。
基本原理
依利特色谱柱的核心在于其液相色谱技术。该技术利用液体作为流动相,通过柱子内的固定相对样品中的不同成分进行吸附和解吸,从而实现分离。在色谱柱中,不同的物质因其物理化学性质(如极性、分子大小、电荷等)不同,会在固定相和流动相之间发生不同的相互作用,导致它们在柱子中的移动速度不同,进而达到分离的目的。
操作指南
开机与准备
1.开机:首先,按下溶剂输液泵上的power键,等待自检完毕后开始操作。
2.排气:逆时针旋转排气阀(不超过180°),打开排气阀,按purge键排气泡,直至流动相连续流出且无气泡。
3.设定流速:按Pump键启动泵,观察屏幕上压力显示,待压力上升平稳后,逐步升高流速至实验所需。
4.检测器与工作站:打开检测器,调节至实验所需波长;打开工作站,查看基线,待基线走平后准备进样。
进样与分析
1.样品准备:将待测样品溶解在合适的溶剂中,并进行必要的预处理,如过滤、稀释等。
2.进样:将预处理后的样品注入进样器,通过移液器将样品送入色谱柱。
3.分离与检测:样品在色谱柱中经过吸附和解吸过程,分离成不同成分。随后,通过检测器(如紫外线检测器、荧光检测器等)进行检测,将检测到的信号转化为电信号,并通过数据采集系统记录。
维护与保养
1.冲洗:实验结束后,使用水或含水甲醇溶液冲洗色谱柱,确保无残留物。若流动相含有无机盐,需保证足够的冲洗时间。
2.清洗:定期清洗单向阀和吸滤头,使用纯净水和异丙醇进行超声清洗。同时,定期冲洗检测池,以去除杂质和微生物。
3.保护柱的使用:加装保护柱可有效过滤流动相和样品中的不溶物和化学污染,延长色谱柱的使用寿命。保护柱应定期更换,以避免柱压过高或峰形变坏。